V chémii je riedenie proces znižovania koncentrácie látky v roztoku. Riedenie reťazca je opakované riedenie roztoku na rýchle zvýšenie faktora riedenia. Tento postup sa zvyčajne vykonáva v experimentoch, ktoré vyžadujú veľmi zriedené roztoky s vysokou presnosťou. Napríklad experimenty zahŕňajúce koncentračné krivky v logaritmickom meradle alebo experimenty na stanovenie hustoty baktérií. Reťazové riedenia sa široko používajú vo vedeckých experimentoch, ako sú biochémia, mikrobiológia, farmakológia a fyzika.
Krok
Metóda 1 z 2: Vykonanie základného riedenia
Krok 1. Stanovte vhodný roztok riedidla
Je veľmi dôležité určiť kvapalinu, ktorá sa má použiť na riedenie. Mnoho roztokov je rozpustných v destilovanej vode, ale nie vždy to tak je. Ak riedite baktérie alebo iné bunky, urobte to na kultivačnom médiu. Tekutina, ktorú si vyberiete, sa použije na všetky riedenia reťazcov.
Ak máte pochybnosti o tom, ktoré riedidlo použiť, vyhľadajte pomoc alebo sa pozrite na internet. Hľadaj príklady od ostatných, ktorí urobili podobné riedenia reťazca
Krok 2. Pripravte niekoľko skúmaviek obsahujúcich 9 ml riedidla
Na prázdne riedenia sa použijú skúmavky. Najprv vložte nezriedenú vzorku do prvej skúmavky a potom riedte postupne v ďalších skúmavkách.
- Pred začatím riedenia označte všetky skúmavky, ktoré ste použili, aby ste sa po spustení experimentu nenechali zmiasť.
- Každá skúmavka bude naplnená 10 riedeniami, začínajúc od skúmavky, ktorej látka nebola zriedená. Riedenie v prvej skúmavke je 1:10, potom v druhej skúmavke 1: 100, v tretej 1: 1000 a podobne. Vopred určte množstvo riedenia, ktoré je potrebné vykonať, aby ste neplytvali roztokom riedidla.
Krok 3. Pripravte si skúmavku obsahujúcu najmenej 2 ml nezriedeného roztoku
Minimálne množstvo roztoku, ktoré je potrebné zriediť na vykonanie tohto riedenia reťazca, je 1 ml. Ak použijete iba 1 ml, nezostane nezriedený roztok. Označte BLM pre neriedené roztoky.
Pred akýmkoľvek riedením roztok dôkladne premiešajte
Krok 4. Vykonajte prvé riedenie
Pipetou odoberte 1 ml nezriedeného roztoku zo skúmavky BLM a vložte ho do skúmavky označenej 1:10 obsahujúcej 9 ml riedidla, potom dôkladne premiešajte. Teraz je 1 ml neriedeného roztoku v 9 ml riedidla. Roztok bol teda zriedený faktorom riedenia 10.
Krok 5. Vykonajte druhé riedenie
Pri druhom zriedení odoberte 1 ml roztoku z tuby 1:10 a potom ho vložte do skúmavky 1: 100, ktorá tiež obsahuje 9 ml riedidla. Pred pridaním do ďalšej skúmavky sa uistite, že je roztok v skúmavke 1:10 úplne premiešaný. Opäť sa presvedčte, či je riedenie v skúmavke 1: 100 úplne premiešané. Roztok zo skúmavky 1:10 sa zriedil 10-krát v skúmavke 1: 100.
Krok 6. Pokračujte v tomto postupe, aby ste vykonali riedenie dlhšieho reťazca
Tento proces sa môže opakovať toľkokrát, koľkokrát je to potrebné, aby sa dosiahla požadovaná koncentrácia roztoku. V experimentoch s použitím koncentračných kriviek môžete vykonať riedenie reťazca, aby ste získali množstvo roztokov s riedeniami 1, 1:10, 1: 100, 1: 1 000.
Metóda 2 z 2: Výpočet faktora riedenia a konečnej koncentrácie
Krok 1. Vypočítajte pomer posledného riedenia v riedení reťazca
Celkový pomer riedenia je možné určiť vynásobením faktora riedenia z každého kroku do posledného kroku. Matematická ilustrácia je so vzorcom Dt = D1 x D2 x D3 x … x D , Dt je celkový faktor riedenia a D je pomer riedidla.
- Povedzme napríklad, že urobíte riedenie 1:10 štyrikrát. Zapojte faktor riedidla do vzorca: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000
- Faktor riedidla vo štvrtej skúmavke pri tomto riedení reťazca je 1: 10 000. Koncentrácia látky po zriedení je 10 000 -krát nižšia ako pred jej zriedením.
Krok 2. Stanovte koncentráciu roztoku po zriedení
Na stanovenie konečnej koncentrácie roztoku po zriedení reťazca musíte poznať jeho počiatočnú koncentráciu. Vzorec je C.koniec = C.začiatok/D, C.koniec je konečná koncentrácia zriedeného roztoku, Czačiatok je počiatočná koncentrácia pôvodného roztoku a D je vopred určený pomer riedenia.
- Napríklad: Ak začnete s roztokom buniek, ktorého koncentrácia je 1 000 000 buniek na ml a pomer riedenia je 1 000, aká je konečná koncentrácia zriedenej vzorky?
-
Pomocou vzorca:
- C.koniec = C.začiatok/D
- C.koniec = 1.000.000/1.000
- C.koniec = 1 000 buniek na ml.
Krok 3. Uistite sa, že všetky jednotky sú rovnaké
Pri každom výpočte sa uistite, že jednotky sú na konci výpočtu vždy rovnaké. Ak sú počiatočnou jednotkou bunky na ml, uistite sa, že jednotky zostanú na konci výpočtu rovnaké. Ak je počiatočná koncentrácia častíc na milión (bpd), potom konečná koncentrácia musí byť tiež v jednotkách bpj.
