Pipety sú laboratórne zariadenia používané na meranie a prenos veľmi malých objemov kvapalín. Presnosť meraní pipiet je veľmi dôležitá, pretože rozdiely v objeme, ktorý pipeta klesla, môžu ovplyvniť experimentálne výsledky. Aby bola zaistená presnosť, je dôležité kontrolovať kalibráciu pipety každých niekoľko mesiacov. Kalibračný proces je užitočný pri kontrole, či z tohto zariadenia kvapká kvapalina v správnom objeme, aby bolo možné v prípade potreby vykonať opravy.
Krok
Časť 1 z 2: Kontrola kalibrácie
Krok 1. Zhromaždite potrebné materiály
Na kontrolu kalibrácie pipety je potrebná pipeta, špičky pipety, destilovaná voda, kadička, teplomer, váha a odmerka. Váha musí byť v mikrogramovej mierke na kalibráciu mikropipety s maximálnou hodnotou 1 l.
- Nebudete potrebovať viac ako 5 ml vody. Naplňte kadičku vodou.
- Uistite sa, že je špička pipety správna a dobre zapadá do pipety.
Krok 2. Zmerajte teplotu destilovanej vody
Vložte teplomer do vody a nechajte ho aspoň minútu odstáť. Ak sa červená čiara teplomera stále pohybuje, počkajte ďalšiu minútu. Po jednej minúte zaznamenajte teplotu. Vezmite teplomer a po dokončení ho osušte.
Teplota vody je dôležité vedieť, pretože bude použitá na výpočty vykonávané na kontrolu kalibrácie
Krok 3. Položte na váhu misku na váženie a váhu vynulujte
V ideálnom prípade má použitá váha dvere a izolovaný priestor vo vnútri. Vložte odvažovačku do vážiacej komory a zatvorte dvere. Ak váha nemá skrinku a dvere, položte na váhu misku na váženie. Stlačte tlačidlo „Zero“alebo „Tare“a počkajte, kým váha nezobrazí nulu.
Vynulovaním váhy sa zníži hmotnosť plastového pohára a umožní sa odvážiť iba hmotnosť látky umiestnenej v pohári
Krok 4. Pripravte pipetu na kalibráciu
Pred spustením pipetu utrite etanolom a uistite sa, že špička pipety nič neupcháva. Pripojte správny hrot pipety k hrotu pipety a určte objem, ktorý sa má testovať.
Pri kalibrácii vyskúšajte najmenší a najväčší objem, ktoré je možné z pipety vybrať
Krok 5. Pred kalibráciou umyte hrot pipety
Stlačte tlačidlo na prvú hranicu a ponorte hrot pipety do destilovanej vody do hĺbky približne 2 mm. Uvoľnite tlačidlo, aby absorbovalo časť tekutiny, a potom tekutinu znova uvoľnite stlačením tlačidla. Tento krok opakujte trikrát, aby ste špičky kvapkadla pred použitím umyli.
Stlačením tlačidla na druhú hranicu odstránite zvyšnú tekutinu z hrotu pipety a vyberte pipetu z vody
Krok 6. Nasajte kalibračný objem
S hrotom pipety umiestneným mimo destilovanej vody stlačte tlačidlo na prvý limit. Ponorte hrot pipety 2 mm hlboko do destilovanej vody a uvoľnite tlačidlo, aby ste nasali kvapalinu do špičky pipety. Pred vybratím špičky kvapkadla z vody počkajte asi 1 sekundu.
Počas aspiračného procesu sa uistite, že je hrot pipety úplne ponorený. V hrote kvapkadla by nemali byť žiadne bubliny, alebo môže byť výsledok nesprávny
Krok 7. Nalejte tekutinu do vážiacej misky na váhe
Špičku pipety umiestnite na spodok odmerky a potom stlačte tlačidlo pipety na prvý limit. Presuňte sa na iný bod, kúsok od vody, potom stlačte tlačidlo na druhú hranicu. Držte tlačidlo stlačené a zdvihnite hrot pipety z odmerky.
Nechajte hrot pripevnený k pipete, pretože ho budete znova používať na ďalšie kalibračné testy
Krok 8. Zaznamenajte hmotnosť uvedenú na váhe
Ak používate dverové váhy, zatvorte dvere vyvažovacej kabíny. Počkajte, kým sa čísla už nezmenia. Napíšte do zošita.
Je dôležité počkať, kým sa čísla na stupnici znova nezmenia, a až potom si ich zapísať. Ak nebudete čakať, poznámky sa pokazia
Krok 9. Tento postup zopakujte, aby sa čítanie vykonalo najmenej 10 -krát
Váhu znova vynulujte, pred použitím špičky pipety umyte, nasajte rovnaký objem tekutiny, odstráňte objem a zaznamenajte hmotnosť. Zaznamenajte hmotnosť destilovanej vody pre rovnaký objem a potom spriemerujte všetky svoje poznámky.
Tento postup môžete zopakovať pre rôzne zväzky, ak je každý zväzok testovaný viackrát
Časť 2 z 2: Výpočet výsledku kalibrácie
Krok 1. Definujte vzorec pre vypočítaný objem
Vzorec na výpočet objemu kvapaliny vyvrhnutej pipetou je V = w * Z, w je hmotnosť vody, Z je konverzný faktor založený na hustote vody, zatiaľ čo V je objem množstva vody. odstránený.
- Premennú Z je možné získať vypočítaním hustoty vody pomocou teploty zaznamenanej na začiatku experimentu.
- Napríklad: Ak je teplota vody 23 ° C, hodnota Z je 1,0035 g/mg.
Krok 2. Vypočítajte celkový priemer kalibrácií pipiet
Objem vody uvoľnenej pipetou sa odvážil najmenej desaťkrát. Ak chcete spriemerovať všetky tieto hodnoty, sčítajte ich všetky a delte 10. Ak ste v procese urobili viac alebo menej, sčítajte celkové výsledky a potom vydelte počtom vykonaných pokusov.
- Napríklad: Hmotnosť vody z 10 experimentov, ktoré ste vykonali s 10 µL pipetou, je nasledovná: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 a 9, 98.
- Priemer je: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9,984
Krok 3. Zapojte premenné do rovnice a vyriešte
Keď pre každú premennú určíte správne číslo, zapojte ho do vzorca a dokončite vypočítaný objem. Na vyriešenie tejto rovnice jednoducho vynásobte priemernú hmotnosť všetkých pokusov hodnotou Z.
Napríklad: V = w * Z = 9 984 * 1,0035 = 10 019
Krok 4. Vypočítajte presnosť pipety
Použite rovnicu A = 100 x Vpriem/V0 na výpočet presnosti pipety. A označuje presnosť pipety, Vpriem je vypočítaný priemerný objem a V0 je hodnota nastavená na pipete. Hodnota presnosti by mala byť medzi 99-101%.
- Ak je pipeta správne kalibrovaná, vypočítaná hodnota by mala byť veľmi blízka skutočnej hodnote nastavenej na pipete.
- Napríklad: A = 100 x Vpriem/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Táto pipeta je správne kalibrovaná.
Krok 5. V prípade potreby odošlite pipetu na kalibráciu
Ak vaša pipeta neprešla kalibračným testom, teraz ju nepoužívajte na experimentovanie. Pipety sú veľmi krehké a drahé laboratórne vybavenie. Kalibráciu nemôžete opraviť sami, pipetu je potrebné odoslať na opravu. Alternatívne príde do vášho laboratória niekoľko spoločností a kalibruje pipetu na mieste.
